博萊霉素是分子生物學中常用的真核抗生素，同時又可以用于大腸桿菌篩選。
在使用帶有bleo或Zeocin R篩選標記的載體DNA轉染或轉化細胞時，向培養(yǎng)基加入Zeocin可以殺死沒有被轉染的細胞，篩選出陽性轉染或轉化的細胞。
博萊霉素應用領域：
可選擇Sh ble基因表達的細胞。與現在使用的其他動物細胞標記物無交叉抗性
因此這種抗生素可用來分離對其他篩選劑（如：慶大霉素，潮霉素）有抗性的克隆。Zeocin是一種屬于爭光霉素家族的糖蛋白抗生素，在體內能作用于大多數細菌（包括E. coli）、真菌（如：酵母菌）、植物細胞、動物細胞。
博萊霉素溶液的配制方法：
1. 先將使用到的所有器具高溫滅菌，儀器表面、工作臺面消毒。
2. 在分析天平上稱取博萊霉素粉末0.500 g，加10 mL無菌水溶液溶解。
3. 用0.2微米濾膜過濾除菌到無菌容器中，然后分裝到 1.5 mL EP管中。
不建議使用螺旋蓋管子，容易污染。-20度保存。
為避免污染和反復凍融，建議分裝成小規(guī)格的，如500 uL。
博萊霉素使用辦法：
1、液體Zeocin可用于細胞培養(yǎng)。
2、用于篩選轉化株的Zeocin濃度根據PH值和鹽濃度改變。
3、PH越高，鹽濃度越低Zeocin活性越大。
4、普通大腸桿菌菌株篩選可在25 ?g/ml zeocin濃度的低鹽LB瓊脂培養(yǎng)基中進行，PH調至7.5 。
5、動物細胞篩選：根據不同細胞系從100 到 750 ?g/ml 。
6、植物細胞篩選：根據不同的細胞種類和培養(yǎng)基從50 到 250 ?g/ml 。
7、酵母篩選：取決于種屬和培養(yǎng)基，S. cerevisiae Sh ble轉化株在50 ?g/ml 濃度的YPD培養(yǎng)基中篩選，PH7.0. 304015
執(zhí)照.jpg)
